微小RNA-34a调控儿童急性淋巴细胞白血病细胞CEM/C1生长和迁移的分子机制研究

作者：侯秋苹; 任妍^*; 付敏; 张丽丽

来源：安徽医药, 2020, 24(12): 2512-2515.

• 白血病
• 转染
• 细胞增殖
• 急性淋巴细胞白血病
• 人急性淋巴细胞白血病细胞CEM/C1
• 微小RNA-34a
• Krüppel样因子4
• 儿童

目的研究微小RNA-34a(miR-34a)对儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞CEM/C1增殖、迁移的影响以及可能作用机制。方法选取重庆市第十三人民医院血液科2017年10月至2018年12月住院32例ALL病儿骨髓样本。另选取该院同期25例原发性血小板减少症病儿的骨髓样本作为对照组。实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(qPCR)检测miR-34a在ALL骨髓样本的表达量;CEM/C1细胞按随机数字表法分为对照组、阴性对照(NC)组、miR-34a组;对照组细胞常规培养,NC组和miR-34a组CEM/C1细胞分别在Lipofectamine 2000介导下转染阴性对照质粒以及miR-34a模拟物,qPCR检测转染效率;细胞计数试剂盒8(CCK-8)实验检测CEM/C1细胞的增殖,Transwell检测细胞迁移;在线软件TargetScan预测miR-34a与Krüppel样因子4(KLF4)的靶向关系,双荧光素酶报告基因进一步进行验证。结果与对照组相比,ALL骨髓样本中miR-34a的表达量下调[(0.33±0.05)比(1.00±0.08),t=15.680,P<0.001]。与对照组(1.00±0.08)相比,NC组miR-34a的表达量(0.99±0.08)无明显变化,miR-34a组CEM/C1细胞中miR-34a的表达量(3.21±0.23)上调(F=423.135,P<0.05)。对照组、NC组、miR-34a组细胞培养48 h后细胞活性分别为(0.65±0.05)、(0.69±0.06)、(0.42±0.04),F=40.818,P<0.001;迁移细胞数分别为(142.36±12.47)个、(137.45±13.49)个、(79.89±6.23)个,F=57.683,P<0.001,差异有统计学意义。与NC与KLF4-wt共转染的细胞相比,miR-34a与KLF4-wt共转染的细胞荧光素酶活性[(0.45±0.03)比(1.00±0.06),t=20.083,P<0.001]降低;与NC与KLF4-mut共转染的细胞相比,miR-34a与KLF4-mut共转染的细胞荧光素酶活性差异无统计学意义[(1.03±0.07)比(1.01±0.07),t=0.495,P>0.05)]。结论 miR-34a在ALL中表达量下调,其可通过对靶基因KLF4的调控影响CEM/C1细胞增殖、迁移。

• 单位
  成都市妇女儿童中心医院; 重庆市第十三人民医院