创伤弧菌转录调控因子OmpR的致病相关功能鉴定

作者：夏文浩; 任雨轩; 徐雨露; 胡玮琳^*

来源：中华微生物学和免疫学杂志, 2022, 42(10): 784-790.

• 创伤弧菌
• OmpR
• 功能鉴定

目的研究转录调控因子OmpR在创伤弧菌中致病相关的生物学功能及分子机制。方法通过基因无痕敲除技术构建创伤弧菌ompR基因敲除株(ΔompR)。通过生长曲线测定法检测不同渗透压下菌株的耐受力, 细菌泳动试验检测运动性, 结晶紫染色试验检测细菌生物膜形成能力, 菌落计数法测定创伤弧菌ΔompR株黏附细胞的变化, 乳酸脱氢酶释放法测定创伤弧菌ΔompR株对细胞毒性的变化, 以明确ΔompR株的致病性相关生物学表型;实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)法检测创伤弧菌ΔompR株和野生株中毒力相关靶基因ompN、ompU、ompA、hcp2的mRNA水平变化。结果成功构建创伤弧菌ΔompR株。与野生株相比, ΔompR株在高渗透压培养基中生长缓慢, 生物膜形成能力减弱, 细菌运动性未有明显差异, ΔompR株对细胞的黏附率和毒性显著低于野生株。ΔompR株中渗透压调节及生物膜形成相关ompN基因mRNA水平显著下调(P<0.05), 其他靶基因mRNA水平无明显变化。结论 OmpR参与调控创伤弧菌高渗透压环境下生长、生物膜形成、对细胞的黏附及毒性。

• 单位
  浙江大学医学院附属儿童医院