摘要
目的优化王枣子愈伤组织的诱导和探究疏松愈伤组织的继代条件,为王枣子悬浮细胞培养奠定初步基础。方法以王枣子无菌苗幼叶为外植体,采用单因素试验研究不同培养基类型对愈伤组织诱导的影响;采用L9(32)正交试验设计,研究2,4-D、KT不同浓度配比对王枣子疏松愈伤组织的增殖培养的影响。结果愈伤组织的诱导率在MS、1/2MS和B5培养基上呈上升趋势。MS的出愈时间最晚,1/2MS的出愈时间次之;在B5培养基上出愈时间最早,且愈伤组织的质地和生长状态较好。正交试验的结果显示,愈伤组织的在B5培养基上添加2,4-D 2.5 mg·L-1+KT 1.0 mg·L-1增殖倍数最小为19.78倍,添加2,4-D 1.5 mg·L-1+KT 0.2 mg·L-1达到最大增殖倍数27.34倍;王枣子疏松愈伤组织增殖试验中2,4-D(P<0.01)的影响效应比KT(P=0.091)大。结论 B5培养基是最佳的王枣子愈伤组织诱导培养基,B5培养基中添加2,4-D 1.5 mg·L-1+KT 0.5 mg·L-1为疏松愈伤组织增殖的最佳配比。
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单位中国中医科学院中药研究所; 生命科学学院; 淮北师范大学