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摘要
旨在探究维甲酸(RA)对体外热处理猪精子活力、抗氧化性能及其糖脂代谢的影响。将相同来源的精液离心重悬于EBSS培养基，随机分为5组，在39℃环境条件下分别孵育0、1、2、3和4 h后，测定精子活力，筛选合适的孵育时间。将相同来源精液离心重悬后，随机分为6组：对照(CON)组、10、50、100、1 000 nmol·L-1 RA组和DMSO组，在39℃环境条件下孵育3 h,测定精子活力，筛选RA适宜添加剂量。将相同来源精液离心重悬后，随机分为4组：37℃、37℃+RA、39℃、39℃+RA。37℃+RA组和39℃+RA组培养基中RA浓度为100 nmol·L-1,37℃组和39℃组培养基中不含RA,37℃组和37℃+RA组于37℃环境下孵育，39℃组和39℃+RA组于39℃下孵育，测定精子活力，并利用蛋白荧光免疫方法，检测维甲酸受体α(RARα)蛋白定位表达，收集精子用于精子抗氧化和糖脂代谢指标的测定。结果显示：1)39℃处理条件下，随着孵育时间的增加，精子的运动性能逐渐变差。2)39℃处理3 h条件下，RA能改善精子运动性能，且浓度为100 nmol·L-1时效果最好。3)与37℃组相比，39℃培养会显著降低精子总活力及前进运动精子比例(P<0.05),显著提高不运动精子比例(P<0.05);与39℃组相比，培养基中含100 nmol·L-1 RA能显著提高精子总活力、前进运动精子比例以及快速运动精子比例(P<0.05),显著降低不运动精子比例(P<0.05);与37℃组相比，39℃培养能显著增加精子丙二醛(MDA)水平(P<0.05),降低T-SOD活力(P<0.05);与39℃组相比，培养基中含100 nmol·L-1 RA能显著降低精子MDA水平(P<0.05),提高精子T-SOD活力(P<0.05)。39℃培养和RA处理对精子丙酮酸、葡萄糖、总胆固醇及甘油三酯含量无显著影响。4)RARα蛋白表达主要集中在精子尾部的主段和末段，头部和富含线粒体的中段有较弱表达，但不明显。100 nmol·L-1 RA未明显改变RARα蛋白表达位置。结论：猪精子能够表达RARα蛋白，热处理使精子运动性能显著降低，RA能改善热处理猪精子的运动性能，这可能与RA能降低精子MDA含量，增加T-SOD活性，提高精子抗氧化能力有关。
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单位南京农业大学; 动物科技学院
