尿毒素硫酸吲哚酚通过OAT-3诱发HK-2细胞纤维化的作用

作者：阿孜古力·克热木; 艾克拜尔·吾曼尔^*; 麦伍拉尼·马木提; 买买提·依斯热依力; 王晨宇; 李九智

来源：西部医学, 2023, 35(12): 1723-1728.

• 硫酸吲哚酚
• HK-2细胞
• OAT-3
• 氧化应激
• 纤维化因子

目的 探讨尿毒素硫酸吲哚酚(IS)通过有机阴离子转运蛋白-3(OAT-3)诱发人正常肾小管上皮(HK-2)细胞氧化应激和纤维化因子的作用。方法 HK-2细胞进行传代培养，待孔板中细胞密度达到80%～90%时分为空白对照组(Control组，加入培养液中正常培养不予干预)、IS处理组(IS组，加入250μmoL IS培养),两组细胞培养24 h;同时，进一步在HK-2细胞中用小干扰RNA(siRNA)沉默OAT-3的表达后提取总RNA,其浓度测定并进行RT-PCR以及Western blot试验检测氧化应激(Nox-4)及纤维化因子(Collagen I、TGF-β1、Smad-3、α-SMA)的mRNA和蛋白表达水平；最后HK-2细胞以抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理后，加入250μmoL IS刺激24 h,采用RT-PCR及Western blot试验检测上述指标的mRNA和蛋白表达水平。结果 RT-PCR结果显示，HK-2细胞以250μmoL IS刺激24 h后，IS显著增加HK-2细胞中氧化应激(Nox-4)及纤维化因子(Collagen I、TGF-β1、Smad-3、α-SMA)的mRNA表达水平(P<0.05);HK-2细胞中siRNA沉默OAT-3的表达后发现，IS诱导的上述氧化应激和纤维化因子的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。以NAC预处理后，HK-2细胞IS刺激24 h发现，NAC有效抑制IS诱导Nox-4、Collagen I、TGF-β1、Smad-3、α-SMA的mRNA和蛋白表达水平(P<0.05)。结论 硫酸吲哚酚经OAT-3摄取到HK-2细胞内诱发氧化应激和纤维化因子高表达。

• 单位
  新疆医科大学; 新疆维吾尔自治区人民医院