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摘要
目的研究肿瘤坏死因子-α(TNF-α)通过内质网应激信号通路对肝癌细胞自噬和增殖的作用。方法利用免疫组织化学检测原发性肝细胞癌患者癌灶组织、配对的癌旁组织,以及肝血管瘤患者瘤旁正常肝组织中TNF-α、BECN1、LC3B、PCNA的表达水平。用人源TNF-α重组因子刺激肝癌细胞株HepG2后,通过蛋白免疫印迹法检测自噬相关蛋白BECN1、LC3B以及细胞增殖标志物PCNA表达水平,并利用自噬抑制剂3-MA抑制HepG2细胞自噬后,检测TNF-α刺激后的细胞活性及PCNA蛋白水平的改变情况。通过蛋白免疫印迹法检测TNF-α刺激HepG2细胞后内质网应激通路相关蛋白eIF2α、p-eIF2α的表达水平。结果肝细胞癌患者癌灶和癌旁组织中TNF-α、BECN1、LC3B、PCNA蛋白表达量均较正常人肝组织升高。TNF-α刺激HepG2细胞后,细胞内BECN1、LC3B、PCNA蛋白表达水平升高,细胞活性增强,使用3-MA抑制HepG2细胞自噬后,细胞PCNA蛋白表达水平以及细胞活性下降,TNF-α刺激HepG2细胞后内质网应激活性标志物eIF2α磷酸化水平明显增加。结论TNF-α通过内质网应激信号通路诱导肝癌细胞自噬,从而促进肝癌细胞的增殖。
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