摘要

目的检测微小RNA(miRNA)-148a-3p在寻常型银屑病患者外周血CD4+ T淋巴细胞中的表达, 探讨其在寻常型银屑病发病中的作用。方法 2017年7月至2018年4月在广州市皮肤病防治所收集寻常型银屑病患者20例, 健康对照20例。抽取受试者外周静脉血, 采用免疫磁珠法分选CD4+ T细胞, 实时定量PCR检测外周血CD4+ T细胞中miRNA-148a-3p的表达;利用生物信息学软件预测miRNA-148a-3p的潜在靶基因, 并通过双萤光素酶报告系统进行验证;采用Western印迹法检测受试者CD4+ T细胞中miRNA-148a-3p潜在靶基因Bim蛋白表达水平。采用SPSS 20软件, 对于符合正态分布的资料, 两个独立样本均数比较采用t检验, 对双变量资料计算Pearson相关系数;对不符合正态分布的资料, 两样本均数比较采用非参数Mann WhitneyU检验, 对双变量资料计算Spearman相关系数。结果寻常型银屑病组18例患者CD4+ T细胞中miRNA-148a-3p的表达水平为5.61 ± 1.66, 健康对照组12例为1.00 ± 0.26, 两组比较, U = 12, P < 0.05。银屑病患者miRNA-148a-3p表达量与银屑病皮损面积和严重程度指数(PASI)呈正相关(r = 0.93, P < 0.001)。生物信息学软件预测B淋巴细胞瘤2相互作用的细胞死亡调节因子(Bim)是miRNA-148a的潜在靶基因之一, 并通过双萤荧光素酶报告系统得到验证。患者组(11例)CD4+ T细胞Bim表达水平为0.69 ± 0.07, 健康对照组8例为0.93 ± 0.06, 两组比较, t = 4.38, P < 0.01。银屑病患者Bim表达量与PASI评分呈负相关(r = -0.774, P < 0.01)。结论 miRNA-148a-3p在寻常型银屑病患者外周血CD4+ T细胞中过度表达, 并可能通过调控Bim蛋白的表达, 导致CD4+ T细胞异常活化, 进而参与银屑病的发生、发展。