联合策略优化犬α干扰素的酵母表达

作者：李丁; 李兰; 安允飞; 毕振威; 于晓明; 陈瑾; 郑其升^*

来源：中国生物工程杂志, 2022, 42(Z1): 88-95.

DOI：10.13523/j.cb.2107010

• 犬α干扰素
• 毕赤酵母
• 重组蛋白产量
• 多拷贝
• 分子伴侣

前期研究在毕赤酵母中分泌表达了犬α干扰素(CaIFN),其活性较高但产量未达到理想水平。目前工作的重点是提高重组蛋白产量。构建含有1、2、4、6、8拷贝CaIFN基因的酵母转化子，其中KM-6CaIFN产量最高，与KM-1CaIFN相比提高了200.6%。共表达8种分子伴侣，其中Hac蛋白能够提高KM-6CaIFN和KM-8CaIFN的目的蛋白产量，提高幅度分别为32.1%和113.1%。在此基础上继续增加CaIFN拷贝数，可观察到KM-12CaIFN-Hac的产量最高，是KM-8CaIFN-Hac的1.33倍，同时是KM-1CaIFN的5.61倍。通过与梯度稀释的BSA进行蛋白质条带比较，评估KM-12CaIFN-Hac的靶蛋白产量约为581 mg/L,为目前报道中酵母产犬α干扰素最高值。

• 单位
  江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心; 江苏省农业科学院; 南京农业大学