摘要

目的探讨苦参碱对葡萄膜黑色素瘤细胞增殖、凋亡及放射敏感性的影响。方法实验研究。体外实验:对数生长期人脉络膜黑色素瘤MuM2B细胞随机分为对照组和苦参碱0.25、0.50、1.00、2.00 g/L组。透射电子显微镜观察细胞形态。噻唑蓝比色法检测细胞增殖;实时定量聚合酶链反应、蛋白质免疫印迹法检测细胞内细胞周期蛋白D (CyclinD)、B淋巴细胞瘤-2 (Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)mRNA和蛋白相对表达量。体内实验:BALB/C小鼠于前肢背部皮下注射MuM2B细胞悬液制备移植瘤模型。建模成功后随机分为空白组和不同浓度苦参碱处理组。空白组小鼠瘤周皮下注射磷酸盐缓冲液;不同浓度苦参碱处理组小鼠瘤周皮下分别注射15、25、50、100 mg/kg苦参碱, 连续7 d。末次给药后称取瘤体重量并测量其体积。多组间比较采用单因素方差分析;组间两两比较采用t检验。结果对照组细胞结构正常, 分布均匀, 未见或少见核固缩;不同浓度苦参碱组随浓度升高, 细胞核固缩逐渐增多, 细胞形态出现明显变化。与对照组比较, 苦参碱0.50、1.00、2.00 g/L组细胞存活率随苦参碱浓度升高及作用时间延长, 细胞存活率逐渐降低, 细胞内CyclinD、Bcl-2 mRNA和蛋白相对表达量逐渐降低, Bax mRNA和蛋白相对表达量逐渐升高;同一放射剂量X线照射下, 苦参碱0.50、1.00、2.00 g/L组细胞存活率逐渐降低, 差异均有统计学意义(P<0.05)。与空白组比较, 不同剂量苦参碱组小鼠肿瘤重量显著降低, 体积显著缩小, 差异有统计学意义(P<0.05)。结论苦参碱通过下调CyclinD、Bcl-2表达, 上调Bax表达, 促进人脉络膜黑色素瘤细胞凋亡, 抑制细胞增殖, 并可提高细胞放射敏感性。