全反式维甲酸与阿糖胞苷或柔红霉素不同联用方式对体外HL-60氧张力及凋亡相关通路的影响

作者：陈敏玲; 黄诗颖; 张顺国; 吴娟

来源：中国临床药学杂志, 2013, 22(04): 201-206.

DOI：10.19577/j.cnki.issn10074406.2013.04.002

• 全反式维甲酸
• 阿糖胞苷
• 柔红霉素
• HL-60
• 氧张力
• 唯BH3域蛋白
• MAPK通路

目的研究全反式维甲酸（ATRA）以不同方式联用阿糖胞苷（Ara-C）或柔红霉素（DNR）,作用于白血病细胞株HL-60致细胞内氧化还原物质及凋亡相关通路蛋白的变化。方法体外培养HL-60细胞株,细胞悬液以密度5×105·mL-1接种于24孔板中。将细胞分为7组,A组为正常对照组;B组将ATRA与Ara-C同时联合作用24 h;C组预先用ATRA作用24 h,然后改用Ara-C继续作用24h;D组预先用Ara-C作用24h,然后改用ATRA继续作用24h;E组将ATRA与DNR同时联合作用24h;F组预先用ATRA作用24h,然后改用DINR继续作用24h;G组预先用DNR作用24h,然后改用ATRA继续作用24h。MTT法测定细胞活力,根据试剂盒说明书测定细胞内总SOD酶活力和GSH水平,Westem印迹检测唯BH3域蛋白Bim表达量及MAPK信号通路磷酸化水平。结果细胞抑制率为序贯给药组（C、D、G、F组）高于同时给药组（B、E组）,在序贯给药组中为先化疗药后ATRA组（D、G组）高于先ATRA后化疗药（C、F组）。与A组相比,各组SOD酶活力均明显降低,其中C、F组降低最多。D、G组细胞内GSH水平明显降低,而B、C、E、F组GSH水平明显升高。唯BH3域蛋白Bim相对表达水平随细胞抑制率升高而增多。B、C、E、F组JNK磷酸化水平降低,D、G组升高;B、C、E组p38磷酸化增多;各给药组ERK磷酸化情况无显著变化。结论不同的药物联用方式能通过细胞内GSH水平、凋亡相关蛋白以及MAPK信号通路来影响HL-60的凋亡水平。

• 单位
  上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心