摘要
目的:研究(nuclear factor,NF)2κB抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸(NF-B Inhibitor pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)对体外培养人翼状胬肉成纤维细胞(human pterygium fibroblast,HPF)增殖的影响,寻找辅助治疗和预防翼状胬肉复发的新方法。方法:取人翼状胬肉标本进行体外贴壁细胞常规培养,取第3~6代细胞进行试验。(1)免疫组化法染色结合细胞生物学特征鉴定成纤维细胞(;2)不同浓度PDTC(2.5,5,10,20,40μmol/L)干预成纤维细胞24,48,72h后,MTT法检测细胞生长抑制率(;3)免疫细胞化学法分别检测PDTC干预48h后HPF增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况。结果:体外培养的翼状胬肉细胞经免疫组化染色可见波形蛋白表达阳性,结合细胞生物学特性可以确定为成纤维细胞。MTT实验表明,随着PDTC干预浓度的增大和时间延长,成纤维细胞生长抑制率增加(P<0.05),在2.5-40μmol/L浓度作用24-72h,PDTC可呈剂量和时间依赖性。PDTC干预后PCNA蛋白表达均下降。当PDTC的浓度在5,10,20,40μmol/L范围内能浓度依赖性地抑制细胞表达PCNA(P<0.05)。结论:PDTC对体外培养的HPF细胞有抑制作用,在一定浓度和时间范围内抑制作用呈剂量与时间依赖性。
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单位华中科技大学同济医学院附属协和医院