大黄素通过减少DNMTs的表达对胰腺癌细胞抑癌基因ppENK发挥去甲基化作用研究

作者：陈亮^*; 唐坚; 褚永权; 叶剑宏; 沈超; 钱晓宇

来源：中国现代医生, 2023, 61(30): 7-10.

• 大黄素
• 胰腺癌
• 去甲基化
• DNA甲基转移酶
• 重亚硫酸盐测序PCR

目的 研究大黄素对胰腺癌细胞Panc1 DNA甲基转移酶（DNA methyltransferases,DNMTs）的影响，及其对抑癌基因前脑啡肽原（pre-proenkephalin,ppENK）启动子区Cp G岛的去甲基化作用，探讨大黄素是否可通过降低DNMTs的表达逆转ppENK的甲基化状态。方法 CCK-8检测不同浓度大黄素对Panc1细胞生长的影响，探索最佳用药浓度，重亚硫酸盐测序PCR(bisulfite genomic sequencing PCR,BSP)检测不同浓度大黄素对ppENK基因甲基化状态的影响，PCR和Western Blot检测ppENK及甲基转移酶DNMT1、DNMT3a的m RNA和蛋白表达情况。结果 大黄素以时间梯度和浓度梯度依赖性抑制Panc1细胞生长，其半数最大抑制浓渡（half maximal inhibitory concentration,IC50）约为40μmol/L，大黄素可使ppENK甲基化状态减弱，非甲基化状态增强；可减弱DNMTs的m RNA和蛋白表达，增强ppENKm RNA和蛋白表达。结论 大黄素可不同程度地使Panc1 ppENK抑癌基因去甲基化，使抑癌基因重新表达。大黄素抑制胰腺癌细胞生长和其去甲基化作用有关，推测大黄素发挥去甲基化作用和其抑制甲基转移酶表达相关。