摘要
实验采用超滤、离子交换层析分离辣木籽蛋白酶解产物,以血管紧张素转换酶(ACE)抑制率为评价指标,筛选具有较高降压活性的肽组分,并通过液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)鉴定其肽序列,结合生物信息学和分子对接技术筛选出潜在的ACE抑制肽,进一步利用傅里叶红外光谱、酶反应抑制剂动力学和四甲基偶氮唑蓝法(MTT)实验解析其二级结构特征及体外活性。结果表明,分离得到的F-b肽组分具有较好的降压效果,共鉴定出11条肽序列,进一步筛选出肽QGPRPQ为潜在的ACE抑制肽(IC50=(1.15±0.3) mmol/L),分子对接表明QGPRPQ可以与ACE以氢键、疏水作用更好地结合;二级结构分析表明QGPRPQ由22.8% α-螺旋、33.3% β-折叠和43.9% β-转角构成;QGPRPQ的抑制模型为混合型抑制,且质量浓度低于0.01 mg/mL时对HepG2细胞无毒性作用。该研究可为辣木籽蛋白源降压肽的开发利用提供重要的理论参考。
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