摘要
目的:建立和优化大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的分离培养条件,以获得群体均一、未分化状态保持良好的MSCs。方法:收集不同周龄大鼠骨髓细胞;以不同浓度Percoll密度梯度离心分离骨髓单个核细胞:以60%低糖DMEM 40%MCDB201为基础培养基,培养24h去悬浮细胞;以不同接种密度传代培养;碱性磷酸酶染色和油红O染色考察MSCs向骨和脂肪组织分化的潜能。结果:采用57%Percoll液的分离效果优于70%Percoll液。6周龄(体重约180g)大鼠能在细胞分离的质和量上达到最佳效果。24h进行悬浮细胞去除、5×10~3/cm~2接种密度传...
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