壮通饮对脑缺血再灌注小鼠神经细胞损伤的影响及其作用机制

作者：杨鑫勇; 王凯华^*; 刘丹宁; 王亚南; 周嫦艳

来源：湖南中医药大学学报, 2023, 43(07): 1155-1164.

• 壮通饮
• 脑梗死
• 缺血再灌注
• 神经功能
• 线粒体自噬

目的 探讨壮通饮对脑缺血再灌注小鼠神经细胞损伤的影响及其作用机制。方法 采用线栓大脑中动脉栓塞法诱导建立小鼠脑缺血再灌注模型，造模成功后的6～7周龄雄性C57BL6J小鼠随机分为模型组、壮通饮组、阿司匹林组、壮通饮联合阿司匹林组，各组再随机分为1、3、7 d时点组，另设不造模的空白组和假手术组，每组10只，按照分组灌胃给药至相应时点。记录各组每日体质量及Zea Longa评分，采用TTC染色法测定脑缺血小鼠的脑梗死体积百分比；HE染色观测缺血病理改变情况，TUNEL染色比较神经细胞凋亡情况，透射电镜观测神经细胞线粒体结构改变及自噬情况，Western blot以及RT-PCR技术分析P62、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Bc1-2/腺病毒E1B19kD相互作用蛋白3(Bc1-2/adenovirusE1B 19kDa interacting protein3, BNIP3)、β-actin蛋白或基因表达情况。结果 与空白组、假手术组相比，模型组体质量明显下降（P<0.05）,TTC染色可见脑组织缺血梗死，出现神经细胞凋亡及线粒体损伤。与模型组相比，各给药组体质量升高（P<0.05），行为学评分降低（P<0.05），梗死体积降低，且持续减小（P<0.05）；神经细胞凋亡率降低（P<0.05）。模型组线粒体结构损伤明显较重，在1 d时各给药组即可观测到较多线粒体自噬小体，而模型组在3 d时才可观测到，在7 d时各给药组大多数线粒体结构完整，可见被溶酶体消化完成的脂滴，而模型组可见自噬小体与自噬溶酶体同时存在。与模型组比较，各给药组P62蛋白表达在1 d时降低，3、7 d时升高（P<0.05）;LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的蛋白比值以及P62、BNIP3的基因表达水平在1 d时升高，7 d时降低（P<0.05）。在各给药组中，壮通饮联合阿司匹林组各项指标均优于其他给药组及模型组（P<0.05）。结论 壮通饮能够减轻脑缺血再灌注小鼠的神经细胞损伤，这可能与促进神经细胞发生线粒体自噬，维持细胞内线粒体稳态有关。

• 单位
  广西中医药大学