神经生长因子对小鼠颌骨骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化的影响

作者：王雅迪; 张鹤扬; 秦巧臻; 黑俊皓; 江小霞; 刘一涵; 贺慧霞^*

来源：口腔颌面修复学杂志, 2022, 23(06): 407-414.

DOI：10.19748/j.cn.kqxf.1009-3761.2022.6.002

• 颌骨骨髓间充质干细胞
• NGF
• 成骨分化
• 增殖

目的：研究不同浓度神经生长因子（nerve growth factor,NGF）对外胚层来源的颌骨骨髓间充质干细胞（jaw bone marrow mesenchymal stem cells,JBMMSCs）增殖及成骨分化的影响。方法：原代培养小鼠JBMMSCs并鉴定。然后分四组分别加入含0 ng/ml、10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml NGF培养液至第二代JBMMSCs中孵育3天，采用CCK-8检测JBMMSCs增殖，碱性磷酸酶试剂盒、qRT-PCR检测ALP、OCN、BMP2、RUNX2等重要成骨及增殖标记物Ki67、MCM-2的表达，Western blot检测OPN、RUNX2以及Ki67、MCM-2的表达。结果：采用骨片贴壁法原代培养的小鼠JBMMSCs经流式细胞术鉴定，表明成功获取JBMMSCs。CCK-8显示3种浓度的NGF均能促进JBMMSCs增殖，且呈浓度依赖性特点。qRT-PCR结果显示：ALP、OPN、RUNX2、BMP2、Ki67、MCM-2表达水平随浓度的升高而增加，但Ki67、MCM-2表达量在100 ng/ml NGF时下降。Western blot结果显示，OPN、Ki67、MCM-2蛋白表达随着NGF浓度的升高而增加，而RUNX2的蛋白表达则在100 ng/ml NGF时呈现下降趋势。结论：一定浓度的NGF可促进JBMMSCs增殖及成骨分化，50 ng/ml为NGF作用的最佳浓度。

• 单位
  解放军总医院