SIRT1/NF-κB信号通路在亚低温促进氧糖剥夺/复糖复氧小胶质细胞极化中的作用

作者：张佳文; 张佳; 王雪婷; 袁阳; 张高峰; 秦伟伟; 刘文洁; 王明山^*

来源：中华麻醉学杂志, 2023, 43(01).

• 抗衰老酶1
• NF-κB
• 低温, 人工
• 低氧
• 小神经胶质细胞

目的评价沉默调节蛋白1/核因子κB(SIRT1/NF-κB)信号通路在亚低温促进氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)小胶质细胞极化中的作用。方法采用随机数字表法将生长良好的BV2小胶质细胞分为4组(n=36):对照组(C组)、OGD/R组(O组)、亚低温组(M组)和亚低温+SIRT1特异性抑制剂EX527组(ME组)。C组正常培养;O组氧糖剥夺3 h后, 于37 ℃复氧复糖21 h;M组氧糖剥夺3 h后, 于33 ℃复糖复氧21 h;ME组细胞于OGD/R前与EX527(终浓度为5 nmol/L)共培养12 h, 其余处理同M组。采用CCK-8法测定细胞存活率;ELISA法检测上清液TNF-α、IL-6和IL-10浓度;qRT-PCR法检测CD206、CD32、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和精氨酸酶1(Arg-1)的mRNA表达, 免疫荧光染色法检测CD206和CD32表达, Western blot法检测iNOS、Arg-1、SIRT1、NF-κB p65(p65)和乙酰化NF-κB p65(Ac-p65)的表达。结果与C组比较, O组细胞存活率降低, 上清液TNF-α、IL-6和IL-10浓度升高, iNOS、Arg-1、CD32和CD206表达上调, SIRT1表达下调, Ac-p65/p65比值升高(P<0.05);与O组比较, M组细胞存活率升高, 上清液TNF-α和IL-6浓度降低, IL-10浓度升高, CD206、Arg-1和SIRT1表达上调, CD32和iNOS表达下调, Ac-p65/p65比值降低(P<0.05);与M组比较, ME组细胞存活率降低, 上清液TNF-α和IL-6浓度升高, IL-10浓度降低, CD206、Arg-1和SIRT1表达下调, CD32和iNOS表达上调, Ac-p65/p65比值升高(P<0.05)。结论 SIRT1/NF-κB信号通路参与了亚低温促进OGD/R小胶质细胞极化的过程。

• 单位
  青岛大学; 青岛市市立医院; 南京医科大学