摘要
目的 建立全血中乙醇代谢物磷脂酰乙醇(phosphatidylethanol,PEth)的超高效液相色谱-串联质谱(ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)检测方法。方法 取100μL全血加入适量含1%甲酸的水溶液,用丙酮沉淀蛋白,离心后取上清液过Bond Elut Certify小柱进行纯化富集,洗脱液经过氮吹后用V异丙醇∶V乙腈=1∶1混合溶液复溶后进UPLC-MS/MS检测,负电离模式下进行选择反应监测扫描,采用外标法定量分析。结果 PEth在全血样本中1~160 ng/mL质量浓度范围内与峰面积呈线性关系(r=0.999 9),检出限为0.2 ng/mL,定量限为1 ng/mL。回收率为97.43%~103.61%,准确度为0.99%~1.77%,日内精密度为0.4%~2.4%,日间精密度为1.1%~3.3%,基质效应为91.00%~99.55%。在体外血样添加乙醇的实验中均未检出PEth。在3例酒后肇事案件中PEth检测均为阳性,检出量分别为195.49、83.67和876.12 ng/mL。结论 所建立方法具有较高的灵敏度和特异性,分析结果准确,适用于全血中PEth的定性定量分析。
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单位新疆医科大学; 基础医学院; 宁德师范学院