竹叶青素的基因合成、原核表达及生物学功能的初步研究

作者：齐元麟; 张明芳; 胡建石; 徐剑文; 林建银

来源：中国药理学通报, 2013, (01): 36-41.

• 蛇毒
• 去整合素
• 竹叶青素
• 原核表达
• 蛋白纯化
• 细胞运动 snake venom
• disintegrin
• trigramin
• E.coli expression
• protein purification
• cell motility

目的合成竹叶青素trigramin基因,在原核系统中表达、纯化,对其功能进行初步研究。方法缓慢退火-PCR法合成竹叶青素基因并克隆入原核表达载体;IPTG诱导表达;亲和层析法纯化重组蛋白;常规柱层析和HPLC纯化天然竹叶青素;Born法测定竹叶青素对血小板聚集的抑制能力;CCK-8法测定竹叶青素对细胞增殖的影响;划痕实验分析竹叶青素对细胞运动的影响。结果合成了竹叶青素基因并在大肠杆菌中表达;获得纯度为89.1%的重组竹叶青素;重组竹叶青素抑制血小板聚集的IC50为0.78μmol.L-1,而天然竹叶青素为0.35μmol.L-1;竹叶青素不能抑制肿瘤细胞增殖,但可抑制细胞体外运动能力。结论本研...

• 单位
  福建医科大学