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摘要
目的研究化学修饰剂聚乙二醇（PEG）对德国小蠊（蟑螂）重组变应原 rBla g 2变应原性的影响。方法 rBla g 2在大肠肝菌中表达后,采用 Ni+亲和层析纯化,然后甲氧基聚乙二醇2-N-羟基琥珀酰亚胺酯（mPEG2-NHS,Mr 为10×103）修饰,经阳离子交换层析纯化,用 SDS-PAGE、免疫印迹及 ELISA 分析其生物学特性。结果 rBla g 2纯化后的相对分子质量（Mr）约39×103;SDS-PAGE 分析 PEG-rBla g 2修饰产物,考马斯亮蓝染色可呈现5条带,而 I2-KI 染色则呈现7条带。对修饰产物的纯化表明阳离子交换层析可分离 rBla g 2和 PEG-rBla g 2;对修饰产物的免疫印迹分析显示Mr 为100×103和130×103的修饰带可与蟑螂过敏患者血清特异性 IgE 结合,同时 ELISA 分析结果表明 PEG-rBla g 2复合物的体外免疫学反应性显著下降,仅为原来的42%。结论 PEG 修饰可保持 rB-la g 2与特异性抗体结合能力,却大大降低变应原的体外免疫学反应性,为重组低致敏原的研究提供了基础资料。
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单位呼吸疾病国家重点实验室; 深圳大学; 广州医学院
