乙型肝炎病毒前-X融合蛋白结合蛋白的筛选

作者：肖鸿敏; 任建林; 潘金水; 施华秀; 许**; 周飞; 董菁

来源：中国肝脏病杂志(电子版), 2010, (02): 1-5.

• 乙型肝炎病毒
• 酵母双杂交技术
• 前-X融合蛋白
• 结合蛋白 Hepatitis B virus
• Yeast-two hybrid technique
• Pre-X fusion protein
• Binding protein

目的利用酵母双杂交技术自肝细胞cDNA文库中筛选HBV前-X(pre-X)融合蛋白结合蛋白,探讨pre-X融合蛋白的生物学功能。方法 PCR扩增HBV pre-X基因序列,根据酵母双杂合体系构建诱饵质粒pDEST32-pre-X,并测定DNA序列验证。将质粒pDEST32-pre-X转化为酵母细胞MaV203,应用Western blot验证pre-X融合蛋白在酵母细胞中正确表达,再与转化为人肝细胞cDNA文库质粒的酵母细胞pDEST22配合,在营养缺陷型培养基和X-gal上三重筛选阳性菌落,提取阳性酵母菌落的猎物质粒进行DNA测序。利用核苷酸数据库及生物信息学技术,对筛选结果进行分析。结果成...

• 单位
  福建医科大学; 厦门大学附属中山医院; 福建医科大学附属第一医院