FGD5-AS1/miR-519d-3p轴调控高糖诱导的肾小管上皮细胞HK-2炎症因子表达和细胞凋亡

作者：陆洁雅; 卫德强^*; 唐燕; 许琦

来源：蚌埠医学院学报, 2023, 48(03): 290-295.

DOI：10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2023.03.003

• 糖尿病肾病
• FGD5反义RNA1
• 炎症
• 细胞凋亡

目的：探讨FGD5-AS1对高糖诱导的肾小管上皮细胞HK-2肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)表达、细胞凋亡的影响及其机制。方法：25 mmol/L葡萄糖诱导HK-2细胞24 h后，RT-qPCR检测细胞中FGD5-AS1和miR-519d-3p表达量。分别转染FGD5-AS1过表达载体(pcDNA-FGD5-AS1)、miR-519d-3p抑制剂或共转染pcDNA-FGD5-AS1与miR-519d-3p模拟物至HK-2细胞，用25 mmol/L葡萄糖诱导转染后的细胞24 h, ELISA法检测细胞培养上清液中TNF-α、IL-6水平，流式细胞术、Western blotting分别检测细胞凋亡率及凋亡相关蛋白cleaved-caspase3、cleaved-caspase9的表达。双荧光素酶报告基因实验验证FGD5-AS1和miR-519d-3p的调控关系。结果：与对照组比较，HK-2细胞经高糖诱导后，细胞中FGD5-AS1表达量明显降低(P<0.01),miR-519d-3p表达水平明显升高(P<0.01)。上调FGD5-AS1或下调miR-519d-3p的HK-2细胞经高糖诱导后，炎症因子TNF-α与IL-6水平、细胞凋亡率、凋亡相关蛋白cleaved-caspase3及cleaved-caspase9表达均降低(P<0.05～P<0.01)。FGD5-AS1靶向结合miR-519d-3p,且上调FGD5-AS1的HK-2细胞中miR-519d-3p表达明显降低(P<0.01)。过表达miR-519d-3p可逆转上调FGD5-AS1表达对高糖诱导的HK-2细胞炎症因子TNF-α与IL-6水平和细胞凋亡的影响。结论：上调FGD5-AS1可能通过靶向下调miR-519d-3p抑制高糖诱导的HK-2细胞炎症因子表达和细胞凋亡。