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摘要
甘蓝型油菜是我国最重要的食用植物油来源。在相同遗传背景下黄籽油菜的种子具有种皮薄、含油量高和蛋白质含量高、纤维素和多酚含量低、油质透明等优点。前人研究表明，油菜的模式植物拟南芥TT2基因与种皮颜色有关，而目前油菜TT2基因研究较少。为明确甘蓝型油菜TT2基因功能，利用RNA干扰技术沉默甘蓝型TT2基因。首先构建TT2基因RNA干扰载体，通过农杆菌介导法获得转基因材料。对花后15 d的幼种进行TT2基因定量表达分析。考察转基因材料农艺性状，收获种子进行冷冻切片观察种皮厚度变化，测定种皮中木质素、原花青素含量变化。结果显示种皮结实率降低，种皮颜色变浅。细胞冷冻切片结果显示，种皮变薄、栅栏组织稀疏。生理指标测定木质素、原花青素含量均下降。定量PCR显示，RNA干扰技术抑制油菜中TT2基因的表达。研究结果说明，甘蓝型油菜TT2基因特异性在种子内种皮表达，与预测一致。TT2基因缺失导致种皮色素积累减少，种皮颜色变浅，种皮厚度变薄，栅栏组织稀疏。木质素含量降低表明木质素代谢途径作为苯丙烷通路的分支受到TT2基因缺失影响。原花青素含量降低表明类黄酮代谢途径受TT2基因缺失影响。这与黄籽与黑籽油菜区别相一致。本研究为甘蓝型黄籽油菜种皮色泽的遗传性提供依据，推动甘蓝型黄籽油菜的育种进程。
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单位西南大学; 长治职业技术学院
