抗NRP-1 b1/b2单克隆抗体对胃癌BGC-823细胞侵袭及迁移的抑制作用及其机制

作者：丁园; 高鹏; 周娟; 代玉娟; 陈玉强; 颜江华; 陈黎静

来源：肿瘤研究与临床, 2017, 29(11): 726-730.

• 胃肿瘤
• 抗体,单克隆
• 细胞迁移分析
• 肿瘤侵润

目的观察自主研发的抗NRP-1b1/b2IgG1型特异性单克隆抗体(NRP-ImAb)对胃癌细胞BGC-823迁移及侵袭的影响,并探讨其可能的作用机制。方法实验室带制备NRP-1mAb,利用流式细胞术检测抗体纯度。在实验室保存胃癌细胞株BGC-823的培养液中加入不同浓度的NRP-1mAb进行培养,采用Transwell法观察12 h后BGC-823细胞的迁移、侵袭情况。利用蛋白印迹法分析NRP-ImAb作用后相关信号蛋白磷酸化情况。结果利用专利技术制备的NRP-1mAb在作用于胃癌细胞BGC-82312 h后,能减少BGC-823迁移、侵袭的细胞数量。对照组(不加任何试剂)与给药组(NRP-1mAb 25、100、400μg/ml)穿过基底膜的细胞数分别为(167±9)、(138±5)、(98±5)、(36±4)个,差异有统计学意义(F=22.6,P<0.01),穿过滤过膜的细胞数分别为(231±40)、(224±19)、(176±26)、(124±34)个,差异有统计学意义(F=26.63,P<0.01),其中100、400μg/ml给药组分别与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.001)。高浓度NRP-1mAb(100μg/ml)作用BGC-823细胞10 min后细胞液中Akt磷酸化水平明显下降,30 min后很难检测到磷酸化Akt。结论 NRP-1mAb可能通过降低Akt磷酸化水平,抑制胃癌细胞BGC-823的迁移、侵袭,且与浓度呈正相关。

• 单位
  厦门大学; 厦门大学附属成功医院