摘要
目的:探究参黛清肠汤对溃疡性结肠炎相关癌变(UCAC)的抑制作用及可能机制。方法:85只C57BL/6小鼠采用葡聚糖硫酸钠(DSS)/氧化偶氮甲烷(AOM)复合法制备UCAC小鼠模型,另取10只小鼠不予造模作为空白组。将造模成功的51只UCAC小鼠按随机数字表法分为模型组(11只)、水飞蓟宾组(10只)、参黛清肠汤低剂量组(10只)、参黛清肠汤中剂量组(10只)、参黛清肠汤高剂量组(10只)。空白组、模型组给予生理盐水灌胃,水飞蓟宾组给予36 mg/kg水飞蓟宾灌胃,参黛清肠汤低、中、高剂量组分别给予15、30、60 mg/kg参黛清肠汤灌胃,体积均为1 m L/100 g,1次/d,连续4周。观察小鼠一般情况,观察小鼠疾病活动指数(DAI)变化,HE染色观察小鼠结肠组织病理学变化,TUNEL染色检测小鼠结肠组织细胞凋亡情况,MTT法检测小鼠结肠癌细胞增殖情况,RT-qPCR检测小鼠结肠组织PI3K m RNA、Akt m RNA、m TOR m RNA、Bcl-2 m RNA、Bax m RNA表达,Western blotting法检测小鼠结肠组织PI3K/Akt-mTOR通路相关分子及Bcl-2、Bax蛋白表达。结果:模型组小鼠饮水、进食量减少,精神萎靡、反应迟钝,懒动,体质量减轻,毛发无光泽,大便稀软,出现脓血便。模型组中2只小鼠因严重便血死亡,结肠黏膜上皮脱落,腺体萎缩,上皮内瘤变,部分出现浸润癌。水飞蓟宾组和参黛清肠汤低、中、高剂量组小鼠均较模型组好转。与空白组比较,模型组小鼠DAI评分,PI3K m RNA、Bcl-2 m RNA相对表达量,PI3K、p-Akt、p-mTOR、Bcl-2蛋白相对表达量均明显升高,结肠组织细胞凋亡数量明显减少,Bax m RNA和蛋白表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,水飞蓟宾组和参黛清肠汤低、中、高剂量组小鼠DAI评分,结肠组织PI3K m RNA、Bcl-2 m RNA相对表达量,PI3K、p-Akt、p-mTOR、Bcl-2蛋白相对表达量均明显降低,结肠组织细胞凋亡数量均明显增多,Bax m RNA和蛋白相对表达量明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);参黛清肠汤上述作用均呈剂量依赖性,且参黛清肠汤中剂量组各指标与水飞蓟宾组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:参黛清肠汤可介导PI3K/Akt-mTOR通路抗溃疡性结肠炎相关癌变。
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单位河北省中医院