RUNX1对牙髓干细胞的增殖及成骨、成脂分化的影响

作者：崔钰嘉; 郭黛墨; 孙建勋; 杨月翼; 谢静; 张德茂^*

来源：四川大学学报（医学版）, 2021, 52(03): 416-422.

• 成骨分化
• 成脂分化
• Runt相关转录因子1
• 牙髓干细胞
• 增殖

目的研究Runt相关转录因子1(Runt-related transcription factor 1,RUNX1)对牙髓干细胞(dental pulp stem cell,DPSC)增殖、成骨向分化、成脂向分化的作用。方法转染建携带目的基因RUNX1和绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒载体至DPSC 48 h后,通过荧光标记GFP和Western blot确定转染效率。过表达RUNX1后,CCK-8法和克隆形成实验检测DPSC增殖能力和克隆形成能力,流式细胞术检测DPSC细胞周期。转染沉默RUNX1的siRNA至DPSC。矿化诱导后,通过碱性磷酸酶活性检测和茜素红染色,观察过表达/沉默RUNX1对DPSC成骨向分化的影响;成脂诱导后,通过油红O染色,观察过表达/沉默RUNX1对DPSC成脂向分化的影响。结果转染慢病毒后RUNX1蛋白在DPSC中过表达,荧光检测示慢病毒转染成功,稳定表达GFP蛋白的细胞均在70%以上。过表达RUNX1后DPSC细胞增殖速度增快、克隆形成能力增强、S期细胞比例增加(P<0.05)。RUNX1过表达后DPSC的碱性磷酸酶活性和矿化结节形成能力增强,脂滴减少(P<0.05);RUNX1敲低后DPSC的碱性磷酸酶活性和矿化结节形成能力减弱,脂滴增加(P<0.05)。结论 RUNX1促进DPSC增殖和成骨向分化,抑制DPSC成脂向分化。

• 单位
  口腔疾病研究国家重点实验室; 四川大学华西口腔医院