鸭瘟病毒、鹅细小病毒和番鸭细小病毒三重PCR检测方法的建立

作者：饶体宇; 张益; 鲜思美^*; 包细明; 李婷; 吴伯梅; 张友; 吴专伟; 彭庆波

来源：畜牧与兽医, 2019, 51(07): 85-89.

• 鸭瘟病毒
• 鹅细小病毒
• 番鸭细小病毒
• 多重PCR

为建立鉴别鸭瘟病毒(DPV)、鹅细小病毒(GPV)和番鸭细小病毒(MDPV)的多重PCR检测方法,参考文献合成针对DPV UL6基因、GPV NS基因和MDPV VP1基因序列的特异性引物。通过优化多重PCR反应中的引物浓度和退火温度,建立快速鉴别3种病毒的多重PCR方法,并对该方法的特异性、敏感性和重复性进行检验。结果显示,该方法对禽流感病毒、新城疫病毒、鸭肝炎病毒、鸭源巴氏杆菌、鸭疫里氏杆菌的核酸扩增结果均为阴性,表明特异性较强;DPV、GPV和MDPV的最低核酸检出量分别为237.3 pg、22.45 pg和204.6 pg,表明敏感性良好;该方法对DPV+GPV+MDPV、DPV+GPV、DPV+MDPV、GPV+MDPV、DPV、GPV和MDPV的核酸均能扩增出与预期大小一致的目的条带,表明该多重PCR方法重复性较好。本研究方法具有特异性强、敏感性良好、重复性较好和快速简便等特点,可用于DPV、GPV和MDPV临床感染病例的联合检测与鉴别诊断。

• 单位
  贵州大学; 动物科学学院