基于HPLC和网络药理学方法的三化汤治疗脑缺血活性成分含量测定及作用靶点预测

作者：路颖慧; 黄颖^*; 孙明杰; 李雯洁

来源：国际中医中药杂志, 2021, 43(11).

• 三化汤
• 脑缺血
• 网络药理学
• 靶点
• 含量测定
• 质量控制

目的结合HPLC和网络药理学方法对三化汤治疗脑缺血的活性成分进行含量测定, 预测其发挥作用的潜在靶点。方法采用HC-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm), 流动相为甲醇-乙腈-0.05%磷酸水, 梯度洗脱, 流速1.0、0.8 ml/min;检测波长254 nm, 柱温30 ℃, 进样量10 μl。运用TCMIP V 2.0平台检索大黄酸、大黄素、大黄酚、橙皮苷、厚朴酚和羌活醇6种成分作用靶点, 以Cerebral ischemia为关键词, 检索GeneCards、在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)、疗效药靶数据库(TTD)、Disgenet数据库, 筛选6种活性成分治疗脑缺血潜在靶点, 构建蛋白质相互作用网络和疾病-成分-靶点-通路整合网络。结果三化汤中6种活性成分大黄酸、大黄素、大黄酚、橙皮苷、厚朴酚和羌活醇线性范围分别为0.080 4～0.804 0 μg、0.015 3～0.382 0 μg、0.041 8～0.626 4 μg、0.312 6～3.908 0 μg、0.037 9～0.568 8 μg、0.045 3～1.359 6 μg, 相关系数均大于0.999 0。经测定7份样品中上述6个成分含量范围分别为0.887～0.971 mg/g、0.094～0.101 mg/g、0.110～0.119 mg/g、1.494～1.669 mg/g、0.126～0.145 mg/g、0.153～0.167 mg/g。网络药理学分析发现, TNF、TP53、MAPK14、JUN、IL1B、MYC、ESR1、ICAM1、PTGS2、PPARG为三化汤中6种活性成分治疗脑缺血的核心靶点。结论建立了三化汤治疗脑缺血6种活性成分质量控制方法, 该方法样品处理简便, 色谱条件简单, 结果准确。明确了三化汤中6种活性成分治疗脑缺血的10个潜在靶点, 为进一步研究其作用机制奠定基础。

• 单位
  中国中医科学院医学实验中心; 北京中医药大学