CircRNA.0007127通过miR-513a-5p/CASP8轴触发K-562细胞凋亡（英文）

作者：李夏静; 张怡宇; 王宁; 苑召虎; 陈小洁; 陈奇聪; 邓晖; 童欣欣; 陈洪林; 段玉友; 魏亚明

来源：Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology), 2022, 23(09): 732-749.

• CircRNA.0007127
• MiR-513a-5p
• 胱天蛋白酶8(CASP8)
• 凋亡
• K-562细胞

目的：探讨CCR4-NOT复合物亚基2基因（CNOT2）来源的环状RNAcircRNA.0007127在凋亡通路中的作用。创新点：本研究发现，circRNA.0007127与K-562细胞凋亡相关，可能是一个预测K-562细胞凋亡的分子标志物。并首次证实了细胞凋亡中circRNA.0007127/miR-513a-5p/CASP8的调控轴。方法：使用miRanda、TargetScan和RNAhybrid软件对circRNA.0007127的靶微小RNA(miRNA)进行预测，筛选具有凋亡相关基因结合位点的miRNA。在H2O2诱导的K-562细胞中，通过定量聚合酶链反应、流式细胞术、线粒体膜电位、免疫荧光、蛋白印迹和胱天蛋白酶8(CASP8)蛋白活性实验来对circRNA.0007127及其下游靶点miR-513a-5p进行体外验证。circ RNA.0007127–mi R-513a-5p以及CASP8–miR-513a-5p的相互作用分别通过荧光素酶报告基因检测得到验证。结果：沉默circRNA.0007127通过抑制CASP8通路激活降低K-562细胞凋亡。与对照组相比，CASP8表达减少2倍，CASP8蛋白43-kD片段显著减少（P<0.05）。荧光素酶报告实验表明，circRNA.0007127可以结合miR-513a-5p或CASP8，差异极显著（P<0.001）。miR-513a-5p过表达抑制K-562细胞中CASP8基因表达水平（4倍）和CASP8蛋白43-kD片段水平（P<0.01）。挽救实验表明，circRNA.0007127siRNA和miR-513a-5p抑制剂共转染增加CASP8基因表达和凋亡率，提示miR-513a-5p抑制剂是circRNA.0007127的拮抗分子。结论：CircRNA.0007127通过miR-513a-5p/CASP8轴调控K-562细胞凋亡，可作为K-562细胞新的分子靶点。

• 单位
  华南理工大学; 生命科学研究院