摘要
目的探讨电针(electroacupuncture, EA)对脑缺血再灌注损伤后血管再生的影响及肿瘤转移相关蛋白1(metastasis-associated genes 1, MTA1)在其中的作用。方法 80只8~10周龄C57小鼠采用随机数字表法分为5组(每组16只):假手术组(Sham组)、脑缺血再灌注损伤组[大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO)组]、EA治疗组(EA组)、对照干扰小RNA(small interfering RNA, siRNA)组(Control siRNA组)、MTA1 siRNA组。Sham组不做任何处理;MCAO组行MCAO, 在建模后第3天仅接受麻醉及针刺, 不给予EA刺激, 连续5 d;EA组MCAO建模后第3天, 在"百会"穴进行EA治疗, 连续5 d;Control siRNA组MCAO建模后在缺血半暗带区注射对照siRNA, 后续处理同EA组;MTA1 siRNA组MCAO建模后在半暗带区注射MTA1 siRNA, 后续处理同EA组。采用神经功能学评分、2, 3, 5-氯化三苯基四氮唑(2, 3, 5-triphenyltetrazolium chloride, TTC)和TUNEL染色法分别测定神经功能、脑梗死面积和神经元凋亡数量, 同时采用Western blot法检测MTA1、裂解的胱天蛋白酶-3(cleaved caspase-3)和血管性血友病因子(von willebrand factor, vWF)蛋白水平;RT-PCR法测定MTA1 mRNA水平;免疫荧光法标记血管内皮并计算血管密度;比较各组小鼠MCAO术前、术中及术后PaO2、PaCO2、pH、脑血流量及肛温变化情况。结果与MCAO组比较, EA组和Control siRNA组神经功能学评分、vWF蛋白水平及血管密度增加(P<0.05), 而脑梗死面积、cleaved caspase-3蛋白水平及神经元凋亡数量减少(P<0.05);EA组MTA1蛋白水平及MTA1 mRNA水平增加(P<0.05)。与Control siRNA组比较, MTA1 siRNA组神经功能学评分、vWF蛋白水平及血管密度降低(P<0.05), 脑梗死面积、cleaved caspase-3蛋白水平及神经元凋亡数量增加(P<0.05)。与Sham组比较, 其余4组小鼠术中脑血流量明显减少(P<0.05), MCAO组和EA组MTA1蛋白水平及MTA1 mRNA水平增加(P<0.05)。其余各组指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 EA通过上调MTA1促进血管生成改善脑缺血再灌注损伤后神经功能。
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单位中国人民解放军空军军医大学; 第一附属医院消化内科; 西安市红会医院