凉血活血方通过抑制NLRP3炎性小体活化保护脓毒症急性肺损伤小鼠的实验研究

作者：卓玉珍; 杨磊; 鹿燕敏; 李棣华; 刘俊红; 李彩霞; 崔立华; 钟成梁^*

来源：中国中西医结合外科杂志, 2022, 28(02): 173-178.

• 凉血活血方
• 脓毒症
• 急性肺损伤
• NLRP3炎性小体
• 核因子-κB
• 信号传导与转录激活因子3

目的：观察凉血活血方对脓毒症急性肺损伤(ALI)小鼠的保护作用并探索其作用机制。方法：将72只雄性C57BL/6小鼠72只，采用盲肠结扎穿刺术(CLP)制备ALI小鼠模型，将小鼠随机分为3组：假手术组、模型组和凉血活血方组。凉血活血方组灌胃给予凉血活血方水煎剂（6 g/kg）连续2 d(1次/d)，假手术组和模型组给予同等剂量生理盐水灌胃。术后24 h麻醉取材。HE染色观察肺组织病理变化；ELISA法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-6、IL-1β水平；Western blotting检测肺组织核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体、核因子（NF）-κB、信号传导与转录激活因子3(STAT3)信号通路相关蛋白表达；检测肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性；检测肺组织湿干重比（W/D）。结果：HE染色发现模型组肺组织损伤严重，肺组织结构紊乱，肺泡壁增厚，有明显炎性细胞浸润或出血，经凉血活血方治疗能明显减轻肺组织损伤程度，炎性细胞浸润减少；与假手术组比较，模型组肺组织MPO活性增加，水肿明显，给予中药治疗后可以明显抑制MPO增加，并且减轻肺组织水肿；ELISA检测发现凉血活血方能够降低ALI小鼠BALF中TNF-α、IL-6、IL-1β等炎性因子的水平（P<0.05）。Western blotting检测证实凉血活血方能够降低ALI小鼠肺组织NLRP3、ASC、Caspase 1 P20、IL-18、IL-1β等NLRP3炎性小体相关蛋白表达水平（P<0.05），也能降低NF-κB、STAT3蛋白磷酸化水平（P<0.05）。结论：凉血活血方对脓毒症所致ALI小鼠具有明显的保护作用，其作用机制可能是通过抑制NLRP3炎性小体活化和NF-κB、STAT3通路激活，从而减少下游相关炎性因子的释放，减轻肺组织损伤。

• 单位
  天津中医药大学第一附属医院; 天津市南开医院