Akt2-Bad信号通路参与NSCLC凋亡

作者：蒋莉; 何芳; 刘丹; 李为民^*; 陈渤江

来源：西部医学, 2021, 33(03): 357-362.

DOI：10.3969/j.issn.1672-3511.2021.03.010

• 非小细胞肺癌
• Akt2
• Bad
• 慢病毒载体
• 细胞增殖
• 凋亡

目的探讨Akt2/Bad信号通路在非小细胞肺癌(NSCLC)凋亡中的作用机制。方法构建稳定过表达Bad同时稳定干扰Akt2的双病毒载体,将未感染慢病毒载体的H1299、H292、SPC-A1、H460及SK-MES-1细胞为NSCLC组,阴性对照病毒转染NSCLC细胞为NC组;稳定干扰Akt2的NSCLC细胞为shAkt2组;稳定过表达Bad的NSCLC细胞为Bad组;稳定干扰Akt2表达的同时稳定过表达Bad基因的NSCLC细胞为shAkt2+Bad组。通过体外实验,观察共感染组细胞凋亡及侵袭能力的变化。应用Western-blot技术检测各组NSCLC细胞株Bad、Akt2以及凋亡相关信号蛋白BCL-2、BCL-XL、caspase-9、Cyto-c蛋白的表达水平。体内构建H1299及SPC-A1荷瘤裸鼠模型,观测瘤体重量,利用TUNEL染色比较Akt2/Bad信号通路对肺癌细胞凋亡的作用。结果与NSCLC组比较,shAkt2+Bad组细胞和移植瘤体中Akt2蛋白水平明显减少(P<0.05),Bad蛋白水平显著增加(P<0.05)。shAkt2+Bad组细胞凋亡率明显高于shAkt2组及Bad组(P<0.05), H1299/SPC-A1体内荷瘤实验表明,shAkt2+Bad组瘤体重量明显低于Bad组、NSCLC组及NC组(均P<0.05),细胞凋亡率均高于其他3组(均P<0.05)。shAkt2和shAkt2+Bad组caspase-9表达显著降低;Bad组、shAkt2组和shAkt2+Bad组cyto-C表达显著增加,而BCL-2、BCL-XL在各组细胞中表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Akt2-Bad信号通路参与NSCLC的凋亡。

• 单位
  第二临床医学院; 南充市中心医院; 四川大学华西医院; 川北医学院附属医院; 川北医学院