磷酸酶PTEN在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤神经元凋亡中的作用

作者：李德渊; 屈艺; 李晋辉; 张莉; 熊涛; 母得志

来源：四川大学学报（医学版）, 2014, 45(05): 767-771.

DOI：10.13464/j.scuxbyxb.2014.05.007

• PTEN
• Bim
• 缺氧缺血
• 凋亡
• 神经元
• 新生大鼠

目的观察新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)时,大脑皮层第10号染色体上磷酸酶及张力蛋白同源缺失的基因(PTEN)蛋白、磷酸化(p)-PTEN蛋白、促凋亡蛋白Bim mRNA及蛋白表达变化,探讨抑制PTEN活性对新生大鼠缺氧缺血(HI)神经元凋亡的保护作用机制。方法将128只10日龄SD大鼠随机分为4组:缺氧缺血组、假手术组、PTEN脂质磷酸酶抑制剂双过氧化钒(bisperoxovanadium,bpv)干预组和生理盐水溶剂组。缺氧缺血组在乙醚麻醉下行右侧颈总动脉结扎,氮氧混合气(92%N2、8%O2)中缺氧2.5h;假手术组不结扎颈总动脉,不作缺氧处理。bpv干预组和溶剂对照组予腹腔内注射bpv和生理盐水,30min后做缺氧缺血处理。各组分别于建模后0.5h及24h处死动物取大脑皮层,应用Western blot检测PTEN、p-PTEN及Bim的蛋白含量。实时荧光定量PCR(Real-Time PCR)定量检测Bim mRNA表达水平,应用TUNEL染色法检测凋亡细胞。结果缺氧缺血组于HI后0.5h及24h,PTEN蛋白无明显变化,p-PTEN蛋白表达降低。HI后0.5h,Bim mRNA及蛋白表达增加,与假手术组比较差异有统计学意义(P<0.05),HI后24h,Bim mRNA及蛋白恢复至基线水平。bpv干预组PTEN蛋白无明显变化,p-PTEN蛋白表达增加,Bim mRNA及蛋白表达降低,与生理盐水组和缺氧缺血组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。bpv干预组于HI后24h,TUNEL染色阳性细胞数较生理盐水组和缺氧缺血组减少,凋亡指数降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论新生大鼠缺氧缺血性脑损伤时,PTEN发生去磷酸化,活性增高,抑制PTEN活性可下调前凋亡蛋白Bim mRNA及蛋白表达,减少神经细胞凋亡。

• 单位
  四川大学华西第二医院; 四川大学