犬小孢子菌PQ-LRP蛋白的定位研究

作者：刘洋; 徐宇; 张芙蓉; 谭灿; 杨国玲^*

来源：中华皮肤科杂志, 2019, 52(03): 189-192.

• 小孢子菌属
• 定位标记
• 绿色荧光蛋白质类
• 犬小孢子菌
• PQ-LRP
• 蛋白定位

目的用增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记犬小孢子菌PQ-LRP蛋白, 明确PQ-LRP蛋白在犬小孢子菌中的定位。方法提取犬小孢子菌总RNA, 反转录为cDNA作为模板, PCR扩增PQ-LRP基因, 将PQ-LRP基因与EGFP基因构成融合基因, 连接到pCAMBIA 1300质粒载体, 采用根癌农杆菌转化法对犬小孢子菌进行转化, 使融合基因LRP-EGFP在真菌通用启动子(Ptrpc)和终止子(Ttrpc)调控下在犬小孢子菌中整合型表达, 激光共聚焦显微镜检测融合蛋白的细胞定位。结果成功构建表达载体pCAMBIA-LRP-EGFP, 融合基因LRP-EGFP在犬小孢子菌中获得整合型表达。激光共聚焦显微镜下LRP-EGFP的荧光信号呈颗粒状或团块状集中于犬小孢子菌的细胞膜上。结论 LRP-EGFP融合基因在犬小孢子菌中成功表达, 且PQ-LRP蛋白定位于犬小孢子菌细胞膜上。

• 单位
  大连医科大学附属第一医院