摘要
本研究旨在对广东省某规模化奶牛场腹泻的病料进行病原分离鉴定,并对分离到的牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus, BVDV)进行遗传进化分析,了解广东省牛病毒性腹泻病毒的流行情况及分子特征。采用提取粪便样品的总核酸,反转录成c DNA,利用RT-PCR方法检测牛病毒性腹泻,并在MDBK细胞中分离牛病毒性腹泻病毒,传至第6代,进行牛病毒性腹泻5’UTR基因PCR检测,测序比对分析该基因与NCBI中公布的牛病毒性腹泻病毒基因的同源性,并对该基因进行遗传进化分析。结果表明,从广东牛场腹泻病料中检测到牛病毒性腹泻阳性样品,接种MDBK细胞后能致细胞出现明显病变,病毒滴度为107.9TCID50/mL;5’UTR基因扩增及序列比对结果显示,该分离株与GenBank上公布的牛病毒性腹泻病毒(GU120242.1)同源性为91.8%,基因遗传进化分析显示,该分离株为BVDV-1m基因亚型,将其命名为BVDV1-GDGZ株。在广东省某牛场腹泻病料中分离1株牛病毒性腹泻病毒,该病毒的基因型为BVDV-1m型,能使犊牛发生严重腹泻,造成急性死亡。本研究明确了引起广东省某奶牛场犊牛腹泻的病原种类,为该养殖场及时有效的防控犊牛腹泻提供了科学依据,同时也丰富了广东省内牛病毒性腹泻的分子流行病学调查数据,也为该地区牛病毒性腹泻防控及疫苗研发提供了理论基础。
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单位中国农业科学院特产研究所