地连二心颗粒对H2O2致小鼠成纤维细胞损伤的保护作用研究

作者：梅和平; 石孟琼; 陈茂华; 梅君; 李浩然; 梅金桥; 张兴中; 罗涛

来源：中药药理与临床, 2017, 33(01): 139-144.

DOI：10.13412/j.cnki.zyyl.2017.01.038

• 地连二心颗粒
• L929细胞
• 过氧化氢
• 氧化应激
• 细胞因子
• 细胞凋亡

目的:观察地连二心颗粒对H2O2致小鼠成纤维细胞损伤的保护作用并探讨其可能机制。方法:用H2O2诱导L929细胞建立氧化损伤模型。MTT法检测不同浓度地连二心颗粒对L929细胞增殖的影响,荧光酶标仪和Hoechst33258染色检测地连二心颗粒对氧化应激诱导细胞凋亡及胞内活性氧(ROS)含量的影响,比色法测定上清液中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性及丙二醛(MDA)含量,用Griess法和ELISA法检测上清液中一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)和白介素-4(IL-4)、白介素-10(IL-10)含量,比色法测定L929细胞中Caspase-3、Caspase-9的活性,Western blot检测L929细胞中Bcl-2、Bcl-x L和Bax、Bad蛋白表达。结果:当地连二心颗粒浓度低于100μg/ml时,无论单用地连二心颗粒还是与H2O2联用均对L929细胞增殖具有促进作用,但是当其浓度大于400μg/ml或与H2O2联用大于200μg/ml时,均对其细胞生长具有抑制作用;地连二心颗粒(25、50、100μg/ml)可抑制L929细胞凋亡,降低细胞内ROS含量;升高上清液中SOD、CAT和GSH-Px活性,降低MDA含量,降低上清液中促炎因子i NOS、NO、TNF-α、IL-1β、IL-6含量,上调抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-x L蛋白表达,下调促凋亡蛋白Bax、Bad蛋白表达,降低Caspase-3和Caspase-9的活性。结论:地连二心颗粒对H2O2致L929细胞氧化损伤具有较好的保护作用,它主要通过抑制损伤的L929细胞过量产生ROS,增强内源性抗氧化酶GSH-Px、SOD、CAT的活性,降低MDA含量,抑制其分泌i NOS、NO、TNF-α、IL-1β和IL-6等促炎因子,促进其分泌IL-4、IL-10抗炎因子,上调抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-x L表达,下调促凋亡蛋白Bax、Bad蛋白表达及降低Caspase-3和Caspase-9活性,进而提高L929细胞存活率,来发挥对受损L929细胞的保护作用。

• 单位
  宜昌市中医医院; 湖北三峡职业技术学院; 三峡大学