性别决定区相关高迁移率族盒蛋白4促进结直肠癌耐药的研究

作者：徐丰; 胡福清; 胡发涌^*

来源：中华实验外科杂志, 2023, 40(03).

• 细胞衰老
• 化疗耐药
• 结直肠癌

目的观察性别决定区相关高迁移率族盒蛋白4(SOX4)对结直肠癌化疗耐药的影响, 并探讨其分子机制。方法检测化疗敏感及耐药结直肠组织和细胞株中SOX4的表达。构建稳定高表达SOX4的结直肠癌细胞系, 利用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞在化疗药物作用下的细胞增殖能力, 用β-半乳糖苷酶染色观察细胞衰老的变化。用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)以及蛋白质免疫印迹(Western blot)方法检测细胞衰老基因p21 mRNA以及蛋白水平, 用Western blot检测p53的蛋白水平变化。在p53缺失结直肠癌细胞中, Western blot检测检测高表达SOX4后, p21蛋白水平的变化。结果与化疗敏感结直肠癌组织相比, 耐药组织中SOX4表达明显升高(敏感组3例升高, 耐药组7例升高)。在细胞实验中得出一致结果(耐药组比对照组1.783±0.021, t=13.20, P<0.05]。在结直肠癌细胞系中高表达SOX4后, 加入5-Fu化疗药物, 观察到细胞耐药性增加(对照组细胞活力26%, 实验组分别为74%及70%), 衰老作用降低(衰老细胞比率对照组41%, 实验组分别为23%和21%)。高表达SOX4后, 结直肠癌细胞p21表达水平下降(实验组比对照组分别0.324±0.059, t=4.30, P<0.05;0.297±0.037, t=5.30, P<0.05), 而p53水平无明显变化(实验组比对照组分别为1.164±0.049, t=0.45, P>0.05和1.067±0.067, t=0.41, P>0.05)。当p53缺失时, 高表达SOX4不能影响p21表达水平(实验组比对照组为0.983±0.108, t=0.35, P>0.05)。结论化疗耐药结直肠癌SOX4表达水平升高, SOX4可能通过p53调节p21进而抑制细胞衰老, 促进结直肠癌化疗耐药。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院