骨髓抽提物小粒和单个核细胞分别培养提高间充质干细胞富集效率

作者：邢文; 刘鹏霞; 刘蒙; 杨少光; 赵钦军; 李建平; 卢士红; 任红英; 黄颖; 吴昊; 刘斌; 张磊; 韩忠朝

来源：中国实验血液学杂志, 2010, 18(6): 1552-1559.

• 间充质干细胞
• 骨髓小粒
• 单个核细胞
• 密度梯度离心
• 组织块培养

骨髓是间充质干细胞(MSC)的主要来源.在大多数研究中,先用密度梯度离心法分离出单个核细胞(MNC),再将MNC培养得到MSC.然而,近年来的研究显示,这种标准方法分离MSC的效率并不很高.本研究探讨骨髓抽提物小粒是否是造成该法低效的原因及如何更好地从骨髓抽提物小粒中分离出MSC.选取了20例患者,用标准贴壁法培养MNC,用组织块培养法培养骨髓小粒.对于1-10号患者,先从骨髓抽提物中分离得到MNC,再从剩余的骨髓抽提物中过滤出骨髓小粒,比较从MNC和骨髓小粒培养得到的成纤维样细胞的克隆数量和形态;对于11-20号患者,分离顺序正好相反,比较从MNC和骨髓小粒培养得到的贴壁细胞的免疫表型和功能,对剩余的骨髓抽提物也进行了培养.结果表明:骨髓小粒中的贴壁细胞为MSC.如果先过滤出骨髓小粒,再用密度梯度离心法分离出MNC,然后将二者分别进行培养,则可将骨髓抽提物中的MSC完全分离出来.在密度梯度离心法中大多丢掉的骨髓小粒,是骨髓中MSC的又一重要来源.骨髓小粒可用组织块培养法进行培养.结论:将骨髓抽提物小粒和MNC分别培养可以从单次骨髓抽提物中富集更多的MSC.

• 单位
  北京协和医学院; 中国医学科学院; 实验血液学国家重点实验室