红肉苹果冷信号基因MdICE1的表达及其蛋白与MdMYB的互作

作者：王意程; 王楠; 许海峰; 张宗营; 姜生辉; 房鸿成; 张静; 苏梦雨; 许琳; 陈学森

来源：园艺学报, 2018, 45(05): 817-826.

DOI：10.16420/j.issn.0513-353x.2017-0560

• 苹果
• 红肉
• MdICE1
• 花青苷
• 酵母双杂交
• 亚细胞定位
• 原核表达

根据拟南芥AtICE1蛋白序列在苹果基因组中Blast比对得到苹果同源蛋白序列,利用DNAMAN软件设计特异性引物并克隆苹果冷信号基因(MDP0000662999),暂命名为MdICE1。以从新疆红肉苹果与‘富士’杂交F1代中选出的‘紫红3号’叶片诱导出的红色愈伤组织为试材克隆MdICE1,测序发现该基因的开放阅读框长度为1 626 bp,编码541个氨基酸。进化树分析表明,MdICE1与AtICE1在同一进化支上,推测它们具有相似的功能。氨基酸序列比对发现,MdICE1存在bHLH基序。低温处理有利于苹果愈伤组织花青苷的累积;与培养在24℃下的愈伤组织相比,低温(8℃)诱导苹果愈伤组织冷信号基因MdICE1以及花青苷合成相关转录因子基因MdMYB10和MdbHLH3的表达。酵母双杂交试验证明MdICE1可以与MdMYB10相互作用;亚细胞定位发现MdICE1蛋白存在于细胞核内;转化大肠杆菌并诱导获得了MdICE1的重组蛋白,为进一步研究MdICE1蛋白在花青苷代谢途径中的功能奠定了基础。

• 单位
  作物生物学国家重点实验室