加载miRNA-21壳聚糖基纳米粒对牙周膜干细胞成骨分化的影响

作者：吴广升; 王亚男; 惠光艳; 梅涛; 王忠山^*

来源：解放军医药杂志, 2021, 33(01): 1-6.

• 微小RNA
• 壳聚糖
• 牙周膜干细胞
• RUNX2
• 骨桥素
• Ⅰ型胶原酶
• 骨钙素

目的观察壳聚糖/三聚磷酸钠/透明质酸/miR-21纳米粒(CTH/miR-21 NPs)对牙周膜干细胞(PDLSCs)成骨分化的作用。方法采用离子交联法制备CTH/miR-21 NPs,与0.2%的明胶溶液混合后涂覆细胞培养板底部,制备miR-21功能化的反向转染培养板。通过扫描电镜观察纳米粒的分布及交联效果。分析CTH/miR-21 NPs的粒径、电位及形态。原代培养PDLSCs,并对其成骨、成脂分化潜能及细胞表面标记物进行鉴定。将PDLSCs接种于含CTH/miR-21 NPs涂层的培养板,通过荧光显微镜、流式细胞仪观察CTH/miR-21 NPs反向转染PDLSCs的效率,并通过RT-PCR观察其成骨相关基因的表达情况。结果 CTH/miR-21 NPs粒径由147.3 nm增加至288.5 nm,Zeta电位由44.5 mV降至21.7 mV,CTH/miR-21 NPs被明胶交联于培养板底部,呈球形。PDLSCs可以成功地被CTH/miR-21 NPs反向转染,且300、450 pmol/孔组RUNT相关转录因子2(RUNX2)、骨桥素(OPN)、Ⅰ型胶原酶(COLⅠ)及骨钙素(OCN)表达水平高于0 pmol/孔组(P<0.05,P<0.01)。结论 CTH/miR-21 NPs可以高效反向转染PDLSCs并促进成骨相关基因的表达,可以为基因转染技术应用于牙周组织再生提供新的思路。

• 单位
  军事口腔医学国家重点实验室; 中国人民解放军空军军医大学; 中国海洋大学; 青岛市口腔医院