摘要
目的 探讨甲基苯丙胺(methamphetamine,METH)引起心肌细胞发生自噬现象的过程。方法 体内实验:将60只约6周龄的雄性C57Bl/6J小鼠随机(随机数字法)分为3组(对照组、3 d染毒组、7 d染毒组),每组20只,建立METH染毒模型。染毒组小鼠给予腹腔注射单次剂量15 mg/kg METH,2次/d,分别染毒3 d或7 d。对照组小鼠相同时间点给予腹腔注射0.9%的生理盐水共7 d。最后一次腹腔注射24 h后收获小鼠心脏。Western blot法检测心肌自噬相关蛋白的表达。体外实验:心肌细胞系(H9C2)分为两组,对照组(正常培养基),METH组(用900 mmol/mL的培养基干预24 h)。Western blot、免疫荧光检测细胞中自噬相关蛋白表达;透射电子显微镜观察细胞内自噬现象。结果 在体内实验和体外实验中,甲基苯丙胺干预后,心脏自噬相关蛋白p62,Beclin-1和LC3表达量与对照组相比均明显上调,差异有统计学意义(P<0.05);激光共聚焦检测免疫荧光结果示,METH组心肌细胞LC3-Ⅱ较对照组明显增多;电镜结果显示,与对照组相比,METH组细胞的自噬体数量明显增多。结论 甲基苯丙胺可激活心肌细胞的自噬程序。
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单位南京医科大学第一附属医院