摘要
目的分离人卵巢癌细胞系SKOV3和原代卵巢癌细胞中的CD+90细胞,并观察其肿瘤干细胞的生物学特性。方法从卵巢癌患者腹水中分离原代卵巢癌细胞,采用流式细胞术检测人卵巢癌细胞系SKOV3和原代卵巢癌细胞的CD133、CD90阳性率。流式分选得到CD+90、CD-90细胞后,采用RT-PCR法检测其干细胞及上皮间质化(EMT)相关基因mRNA相对表达,Transwell小室侵袭试验观察细胞侵袭力,克隆形成试验观察细胞增殖分化能力,悬浮成球试验观察干细胞潜能,免疫缺陷小鼠体内有限稀释成瘤试验观察成瘤时间和成瘤率。结果人卵巢癌细胞系SKOV3的CD133和CD90阳性率均低于原代卵巢癌细胞,P均<0.05。在人卵巢癌细胞系SKOV3和原代卵巢癌细胞中,CD+90细胞干细胞相关基因(CD133、OCT4)和EMT间质标志相关基因(N-cadherin、Vimentine、MMP9)相对表达、穿到膜背面的细胞数、细胞克隆数、悬浮成球数均高于CD-90细胞,EMT上皮标志相关基因E-cadherin相对表达均低于CD-90细胞,P均<0.05。随着接种细胞数目的增加,CD+90、CD-90细胞的成瘤率和成瘤时间均升高,CD+90细胞升高更明显。结论卵巢癌细胞中,CD+90细胞高表达间质属性基因和干细胞相关基因,具备更高的侵袭力、增殖分化能力、体内成瘤能力和干细胞潜能,CD+90细胞分离可能成为卵巢癌干细胞分离的新方法。
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单位湖北医药学院附属太和医院