人重组阿片受体样受体在CHO细胞稳定表达系统的建立

作者：李玉蕾; 颜玲娣; 李素燕; 温泉; 宫泽辉

来源：军事医学科学院院刊, 2009, (05): 409-411+485.

• 阿片受体样受体
• CHO细胞
• 转染
• 放射性配体-受体结合 human opioid receptor-like 1
• CHO cells
• transfection
• radioligand receptor binding

目的:在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞上稳定转染人重组阿片受体样受体(hORL1),为体外高通量筛选hORL1受体作用药物及相关药物分子机制研究奠定基础。方法:用脂质体介导法将pcDNA3.1(+)-hORL1重组质粒稳定转染到缺乏hORL1的CHO细胞中,然后用含G418的选择性培养液进行筛选,挑取耐药克隆;用放射性配体-受体结合实验进一步筛选阳性克隆,对阳性克隆受体亲和力和表达量进行分析,用[35S]GTPγS结合实验分析表达受体的功能。结果与结论:在稳定转染hORL1的克隆细胞中,[3H]伤害感受肽的Kd和Bmax值分别为(0.44±0.21)nmol/L和(0.35±0.06)pmol/m...

• 单位
  军事医学科学院毒物药物研究所