Taqman MGB探针实时荧光定量PCR检测布鲁菌病的研究

作者：刘艳红; 王清

来源：现代预防医学, 2013, (07): 1348-1351+1356.

• Taqman MGB探针
• 荧光定量PCR
• 布鲁菌
• DNA TaqMan MGB probe
• Real-time PCR
• Brucella
• DNA

目的建立血液标本布鲁菌DNA荧光定量检测方法,探讨其临床应用价值。方法用PUCm-T载体和PCR纯化产物连接,转染DH5a菌,筛选阳性菌落,提取质粒,制作外标准品;在布鲁菌基因组IS71l序列设计一对引物和Taq-Man MGB探针,严格优化反应物的组成和扩增条件,并对该方法进行评价。结果建立的布鲁菌DNA荧光定量PCR方法最低检出率为400拷贝/ml;批内误差为1.8%～6.5%,批间误差为2.6%～9.1%;在4.0×102～4.0×108拷贝/ml之间与Ct值具有很好的线性(Ct=-1.3911Ln(x)+41.65,r=-0.9958);具有较好的稳定性。在布鲁菌临床监测中发现,157...

• 单位
  青岛大学