黄卡瓦胡椒素B促进EGFR的降解进而抑制H1975肺癌细胞的增殖和迁移

作者：唐颖; 李金玲; 王科江; 杨忠云; 李雪森^*

来源：现代肿瘤医学, 2023, 31(01): 17-24.

• 肺癌
• 黄卡瓦胡椒素B
• EGFR-AKT信号通路

目的:研究黄卡瓦胡椒素B对肺癌细胞H1975增殖及迁移的影响并探讨其机制。方法:培养H1975肺癌细胞株，用不同浓度的黄卡瓦胡椒素B处理细胞24、48和72 h后，采用CCK-8法检测黄卡瓦胡椒素B对H1975细胞增殖的影响。Transwell实验检测黄卡瓦胡椒素B对H1975细胞迁移能力的影响。Western blotting检测20μmol/L和40μmol/L黄卡瓦胡椒素B处理16 h后对H1975细胞EGFR-AKT信号通路相关蛋白表达的影响。采用qPCR技术检测黄卡瓦胡椒素B对H1975细胞EGFR mRNA水平的影响。Western blotting检测黄卡瓦胡椒素B对H1975细胞LC3-Ⅰ/Ⅱ蛋白表达的影响。CCK-8实验和Transwell实验分别检测黄卡瓦胡椒素B与EGFR小分子抑制剂联用对H1975细胞增殖和迁移的影响。结果:黄卡瓦胡椒素B在体外能抑制H1975细胞的增殖，且抑制作用呈浓度依赖性。黄卡瓦胡椒素B处理组细胞迁移数明显减少(P<0.05)。Western blotting结果显示，使用黄卡瓦胡椒素B处理16 h后，H1975肺癌细胞的EGFR、p-AKT和AKT蛋白表达水平明显降低(P<0.05),但EGFR mRNA水平无显著改变。当巴佛洛霉素A1(Bafilomycin A1,BAF)或氯喹(Chloroquine, CQ)阻断自噬时，黄卡瓦胡椒素B诱导的对EGFR蛋白的抑制作用被逆转，并且10、20和40μmol/L黄卡瓦胡椒素B可促进H1975细胞LC3-Ⅱ蛋白表达。黄卡瓦胡椒素B与EGFR小分子抑制剂联用能够抑制H1975细胞的增殖和迁移以及p-EGFR和p-AKT的表达。结论：黄卡瓦胡椒素B通过促进EGFR的降解进而抑制H1975肺癌细胞的增殖和迁移。

• 单位
  西南医科大学; 基础医学院