摘要
应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)西藏分离株Tibet07的融合蛋白,并对其抗原性进行鉴定。扩增PPRV Tibet 07株融合蛋白基因,克隆至pFastBac/CT-TOPO载体中,构建重组穿梭质粒pFastBacCT-PPRV-F,构建重组杆状病毒Bacmid-PPRV-F,转染sf9细胞,获得重组杆状病毒。通过SDS-PAGE鉴定F蛋白的表达,利用Western blotting和间接免疫荧光鉴定F蛋白的抗原性。表达的F蛋白在分子质量约59ku处可见特异蛋白条带。重组杆状病毒Bacmid-PPRV-F感染的sf9细胞可与抗PPRV阳性血清发生特异性反应。使用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达了PPRV西藏分离株Tibet 07的融合蛋白,为进一步研究其生物学功能及研制小反刍兽疫的亚单位疫苗奠定了基础。
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单位新疆农业大学; 中国动物卫生与流行病学中心