荧光PCR高分辨率熔解曲线分析法检测食源性金黄色葡萄球菌

作者：黄秀丽; 章丽; 奉夏平; 肖性龙; 余以刚

来源：食品科技, 2014, 39(03): 288-294.

DOI：10.13684/j.cnki.spkj.2014.03.065

• 金黄色葡萄球菌
• sa442基因
• 高分辨率熔解曲线
• 检测
• 荧光PCR

以sa442为靶基因,结合特异性引物,建立了一种快速检测鉴定食品中常见的金黄色葡萄球菌的HRM(高分辨率熔解曲线)real-time PCR法,对该法进行特异性验证,敏感性分析及重复性评价,并实现了其在人工染菌鸡肉样本检测的初步应用。结果表明,该方法具有较强的特异性,对8株金黄色葡萄球菌目标菌株均产生特异性溶解曲线,Tm值为(77.34±0.287)℃,而沙门氏菌、单增李斯特菌、大肠杆菌O157等8种肉产品中常见的食源性非目标病原菌均不产生扩增曲线;灵敏度高,该法对阳性重组质粒PMD18-sa442的检测限为2.00×102 copies/mL;重复性强,同一样品于试验内及试验间的变异系数分别为(0.76±0.52)%和(1.34±0.45)%;且该法可初步应用于人工染菌鸡肉样(染菌量5、10、20 cfu/25 g样品匀浆)的检测。所建立的金黄色葡萄球菌HRM real-time PCR法具有特异性好、灵敏度高、重复性强的特点,能应用于食品样本的检测,为金黄色葡萄球菌的快速检测提供了新的方法。

• 单位
  华南理工大学; 广东省惠州市质量计量监督检测所