摘要
为了研究鸡Ⅲ型胶原蛋白α1链(collagen typeⅢalpha 1 chain, COL3A1)基因的可变剪接状况及新转录本功能,试验以固原鸡15天鸡胚(胚胎期)和180日龄成年鸡(成年期)的心脏、肝脏、脑、肺脏、肾脏、肌肉组织为样品,从15天鸡胚组织样品中分离与培养原代成肌细胞,采用实时荧光定量PCR技术、CCK-8试验、EdU试验、流式细胞技术等鉴定新转录本,分析其表达量,并研究其对固原鸡成肌细胞增殖的影响。结果表明:发现并鉴定出固原鸡COL3A1基因的一种新转录本,命名为Ⅲ型胶原蛋白α1链-a(collagen typeⅢalpha 1 chain-1,COL3A1-a);COL3A1-a在胚胎期肺脏和成年期肌肉组织中表达量较高;干扰固原鸡成肌细胞COL3A1-a的表达,使得COL3A1-a的表达量约下降44%(P<0.05),导致促增殖标志基因PCNA的表达量显著降低(P<0.05),抑增殖标志基因p21的表达量显著升高(P<0.05);干扰COL3A1-a的表达24 h后,细胞活力约下降了10%(P<0.05),EdU阳性细胞数量明显减少,EdU阳性细胞比例约降低了10%(P<0.01),S期细胞比例减少,成肌细胞生长受到抑制。说明干扰COL3A1-a能够抑制固原鸡成肌细胞的增殖,即COL3A1能够促进固原鸡成肌细胞的增殖,研究COL3A1-a有助于解析固原鸡优异生长性状的遗传机制。
-
单位宁夏农林科学院; 西北农林科技大学; 动物科技学院