摘要
目的探讨ATM基因表达沉默对肝癌细胞生长的影响。方法构建靶向人ATM基因的RNA干扰慢病毒载体L1、L2,包装成慢病毒;用含ATM特异性干扰片段的慢病毒感染HepG2细胞,RT-PCR鉴定干扰后ATM基因在细胞中的表达;MTT法检测ATM干扰后对细胞生长的影响。结果ATM的相对表达量阴性对照组与未感染病毒组表达水平接近;病毒感染的L1、L2组表达量低于未感染病毒组(P<0.01);L1、L2组与阴性对照组的表达水平均降低(P<0.01);两干扰组L1、L2组之间的表达量也有差异,L2组降低更为明显,且有统计学意义,L2组沉默效率更高,表达量仅为对照的15.52%,即干扰率为84.48%。MTT法检测结果示ATM基因表达沉默后感染和未感染的HepG2细胞增殖速度无明显改变。结论成功构建ATM基因siRNA慢病毒RNAi表达载体;ATM表达水平减低后,肝癌细胞体外生长无显著抑制。
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