腺病毒介导的黑色素瘤分化相关基因-7抑制内质网应激蛋白表达阻滞MHCC-97H血管形成及转移机制的研究

作者：郑建伟; 张晓梅; 李雁; 秦仁义; 申铭; 吴在德; 薛新波

来源：中华实验外科杂志, 2013, 30(12): 2566-2569.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2013.12.029

• 癌,肝细胞
• 黑色素瘤分化相关基因-7/白细胞介素-24
• 内质网应激蛋白
• 血管形成
• 转移

目的探讨黑色素瘤分化相关基因(MDA)-7抑制内质网应激蛋白表达,以及阻滞MHCC-97H血管形成的机制。方法以人肝癌细胞株MHCC-97H为实验对象,使用噻唑蓝(MTT)法和流式细胞仪比较Ad.MDA-7及对照组、缺氧组及正氧组的细胞生存率,比较缺氧环境中,MHCC-97H凋亡率的变化。荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测MDA-7、细胞外信号调节激酶(ERK)、E-钙黏蛋白(E-cad)、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶(MMP)-9 mRNA的变化。Western blot检测MDA-7、蛋白激酶样内质网激酶(PERK)、E-cad、VEGF、MMP-9蛋白表达的变化。结果 MTT表明缺氧条件下,正氧组正常肝细胞LO2生长抑制率分别为(12.60±4.85)%,(7.80±0.61)%,Ad.MDA-7对正常肝细胞LO2无生长抑制作用。肝癌细胞株MHCC-97H生长抑制率缺氧组,正氧组分别为(5.10±0.09)%、(4.80±0.05)%。缺氧环境中,ERK、VEGF和MMP-9空白组及空白对照组mRNA表达量为[(18.042±5.915)/(17.512±6.354)、(22.654±5.976)/(22.587±7.741)、(22.654±2.789)/(22.587±8.551)]高于正氧组[(10.987±2.514)/(12.347±4.385)、(15.321±4.262)/(15.634±8.521)、(15.321±6.384)/(15.634±4.423)]。缺氧环境中,E-cad mRNA空白组及空白对照组[(6.427±0.512)/(6.042±1.972)]表达低于正氧组[(10.987±2.514)/(12.347±4.385)],而Ad.MDA-7干预后,ERK、VEGF和MMP-9 mRNA缺氧组及正氧组表达量降低[(4.117±1.843)/(5.683±0.794)、(5.371±0.541)/(4.209±0.348)、(5.371±0.941)/(4.209±0.265)],E-cad表达量明显增加[(19.573±5.971)/(21.309±8.544)]。PERK、VEGF和MMP-9蛋白表达与mRNA一致。结论缺氧环境中,肝癌细胞株MHCC-97H生长抑制率与正氧环境中差异无统计学意义,MDA-7基因明显抑制PERK表达,抑制肝癌细胞血管生成作用。同时,MDA-7基因增强E-cad表达,协同其作用,抑制肿瘤细胞转移。

• 单位
  武汉市第五医院; 中南医院; 华中科技大学同济医学院附属同济医院; 武汉大学